低豐度靶標應該選擇哪種類型的ELISA試劑盒以提高檢測成功率??
日期:2025-12-03 10:07:38
針對低豐度靶標,核心是選擇具備信號放大能力和高靈敏度的ELISA試劑盒,優(yōu)先推薦間接ELISA試劑盒,也可選擇雙抗夾心ELISA試劑盒(若為抗原類靶標)或競爭法ELISA試劑盒(部分場景),具體分析如下:
一、優(yōu)先選擇的試劑盒類型
1、間接ELISA試劑盒
這類試劑盒的核心優(yōu)勢是存在二抗介導的信號放大效應:一個一抗分子可結合多個酶標二抗,每個二抗都能催化底物顯色,能將低豐度靶標對應的微弱信號放大數(shù)倍,大幅提升檢測靈敏度,是檢測血清、體液中低濃度抗體類靶標的首選。
2、雙抗夾心ELISA試劑盒(適用于抗原類靶標)
該方法采用“捕獲抗體+檢測抗體”的雙抗體結合模式,一方面對靶標抗原的特異性更強,另一方面若采用生物素-親和素系統(tǒng)的夾心試劑盒(如ABC-ELISA),還能通過親和素的多價結合特性實現(xiàn)二次信號放大,其靈敏度通常比普通直接ELISA高1~2個數(shù)量級,適合低豐度蛋白抗原的檢測。

二、可輔助選擇的特殊類型
1、化學發(fā)光ELISA試劑盒
相比傳統(tǒng)的比色法ELISA,化學發(fā)光ELISA以化學發(fā)光底物替代顯色底物,信號檢測的下限更低,能捕捉到極微量靶標對應的信號,且無背景色干擾,對于超低豐度靶標(如pg級)的檢測成功率顯著高于常規(guī)ELISA試劑盒。
2、競爭法ELISA試劑盒(適用于小分子靶標)
2、競爭法ELISA試劑盒(適用于小分子靶標)
若低豐度靶標為小分子物質(zhì)(如激素、藥物殘留),由于其無法同時結合兩個抗體,需選擇競爭法ELISA試劑盒,該方法通過競爭結合的原理,能精準量化微量小分子,且部分競爭法試劑盒會搭配信號放大模塊提升靈敏度。
三、需避免的試劑盒類型
不建議選擇直接ELISA試劑盒,其無信號放大機制,一個靶標僅能結合一個酶標抗體,信號強度有限,難以檢出低豐度靶標,易出現(xiàn)假陰性結果。






