穩轉細胞株構建服務的流程
日期：2024-04-01 13:40:04
1. 項目咨詢
與服務提供商討論您的項目目標、所需細胞類型和表達要求。
提供目標基因、啟動子和其他相關信息。
2. 構建體設計和構建
服務提供商將設計和構建含有目標基因、啟動子和選擇標記的質粒。
質?？梢酝ㄟ^各種方法構建，如酶切連接、吉布森組裝或金門組裝。
3. 細胞培養和轉染
服務提供商將使用適當的細胞培養基和轉染方法將質粒轉染到目標細胞中。
常見的轉染方法包括脂質體轉染、電穿孔和病毒轉染。
4. 穩定轉染體篩選
轉染后的細胞將在含有選擇劑的培養基中培養，以選擇穩定整合質粒的細胞。
選擇劑可以是抗生素、熒光蛋白或其他標記。
5. 克隆篩選和擴增
穩定轉染的細胞將被克隆到單個培養皿中，以獲得單克隆細胞株。
單克隆細胞株將被擴增并進行進一步分析。
6. 表達分析和驗證
服務提供商將通過免疫印跡、熒光分析或其他方法分析目標蛋白的表達水平。
他們還可以進行功能分析，以評估蛋白質的活性或功能。
7. 細胞株交付
一旦建立并驗證了穩轉細胞株，服務提供商將向您交付細胞株。
細胞株通常以冷凍形式或活細胞形式交付。
其他注意事項
服務提供商可能提供額外的服務，如質粒構建、細胞培養優化和數據分析。
項目時間表和成本將根據項目的復雜性和要求而有所不同。
在選擇服務提供商之前，請務必調查他們的經驗、專業知識和客戶評價。
上一篇： 細胞因子數據庫有哪些?
下一篇： 穩轉株篩選時加多少濃度嘌呤霉素?
