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噬菌體篩選技術原理

日期:2023-04-12 10:58:15

噬菌體篩選技術是一種常用的蛋白質篩選技術,主要基于噬菌體在細菌中的寄生性和選擇性結合特異性。該技術能夠快速、高效地從大量的蛋白質樣本中篩選出具有特定結構或功能的蛋白質。

    噬菌體篩選技術的基本原理如下:

    構建噬菌體文庫(phage display library):將感興趣的蛋白質或多肽等插入噬菌體表面展示庫(phage surface display library)中。

    選擇性結合:將文庫中的噬菌體與特定配體進行接觸,只有與目標配體特異性結合的噬菌體才會被保留下來。

    篩選:通過對噬菌體的進一步處理和篩選,可以篩選出具有特定結構或功能的蛋白質,如新藥物靶標、抗體、酶等。

    噬菌體篩選技術的主要步驟包括:

    建立噬菌體表面展示庫:將興趣的蛋白質或肽序列插入噬菌體表面展示庫中,使其在噬菌體的外膜上展示。

    選擇性結合:將文庫中的噬菌體與目標配體進行接觸,通過選擇性結合來篩選出具有特異性的噬菌體。通常使用ELISA等技術來檢測噬菌體與配體之間的結合情況。

    篩選:通過多次篩選和挑選,將具有更高親和力的噬菌體分離出來,進一步對其進行鑒定和驗證。

    噬菌體篩選技術可以廣泛應用于抗體、酶、受體、肽等類別的蛋白質的篩選。與傳統的克隆和表達技術相比,噬菌體篩選技術具有高通量、高靈敏度、快速、簡單等優點,被廣泛應用于藥物研發、生物學研究等領域。