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抗體提純溶液配制方法

日期:2023-03-15 09:45:51

    抗體提純液的配制通常取決于具體的實驗設計和要求,以下是一般的抗體提純液的組成及配制方法:
    磷酸鹽緩沖液(PBS):用于洗滌和稀釋,配制方法為:將10×PBS緩沖液用純水稀釋至1×PBS濃度,ph調整至7.4左右。
    細胞破碎液:用于細胞破碎和抗體的初步純化。細胞破碎液的組成可以包括不同濃度的鹽、緩沖劑、蛋白酶抑制劑和界面活性劑等。
     常用的細胞破碎液配方包括:
    RIPA緩沖液:50mm Tris-Hcl(pH 7.4)、150mm Nacl、1% NP-40、0.5% sodium deoxycholate、0.1% SDS。
    NP-40緩沖液:50mm Tris-Hcl(pH 8.0)、150mm Nacl、1% NP-40、1mm EDTA。
    Triton X-100緩沖液:50mm Tris-HCl(pH 7.5)、150mm Nacl、1% Triton X-100、0.5% sodium deoxycholate、0.1% SDS。

    層析緩沖液:用于抗體的柱層析。層析緩沖液的組成取決于柱層析的類型和具體的分離條件。
    常用的層析緩沖液包括:
    離子交換層析緩沖液:20mm Tris-Hcl(pH 8.0)、50mm Nacl、5mm imidazole。
    親和層析緩沖液:20mm Tris-Hcl(pH 8.0)、500mm Nacl、5mm imidazole、10mm β-mercaptoethanol。
    凝膠過濾層析緩沖液:20mm Tris-Hcl(pH 7.5)、150mm Nacl、5mm imidazole、10%甘油。

    洗脫緩沖液:用于從柱層析中洗脫抗體。洗脫緩沖液的組成取決于柱層析的類型和具體的分離條件。
    常用的洗脫緩沖液包括:
    離子交換層析洗脫緩沖液:20mm Tris-Hcl(pH 8.0)、1M Nacl、5mm imidazole。