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氰化鉀(KCN)培養基

日期:2010-09-06 11:23:39


成分

蛋白胨      10g
氯化鈉      5g
磷酸二氫鉀    0.225g
磷酸氫二鈉    5.64g
蒸餾水      1000mL
0.5%氰化鉀溶液  20mL
pH7.6

制法

將除氰化鉀以外的成分配好后分裝燒瓶,121℃高壓滅菌15min.放在冰箱內使其充分冷卻。每100mL培養基加入0.5%氰化鉀溶液2.0mL(最后濃度為1∶10000),分裝于12mm×100mm滅菌試管,每管約4mL,立刻用滅菌橡皮塞塞緊,放在4℃冰箱內,至少可保存兩個月。同時,將不加氰化鉀的培養基作為對照培養基,分裝試管備用。

試驗方法

將瓊脂培養物接種于蛋白胨水內成為稀釋菌液,挑取1環接種于氰化鉀(KCN)培養基。并另挑取1環接種于對照培養基。在36±1℃培養1~2d,觀察結果。如有細菌生長即為陽性(不抑制),經2d細菌不生長為陰性(抑制)。

注:氰化鉀是劇毒藥物,使用時應小心,切勿沾染,以免中毒。夏天分裝培養基應在冰箱內進行。試驗失敗的主要原因是封口不嚴,氰化鉀逐漸分解,產生氫氰酸氣體逸出,以致藥物濃度降低,細菌生長,因而造成假陽性反應。試驗時對每一環節都要特別注意。