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ELISA試劑盒檢測后發現樣本稀釋倍數錯誤,能否通過公式修正結果?

日期:2025-08-18 16:44:05

    ELISA檢測中若發現樣本稀釋倍數錯誤,在部分情況下可通過公式修正結果,但需滿足一定前提條件,且修正結果的可靠性可能受影響,具體需結合錯誤類型和實驗情況判斷:
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一、可嘗試修正的情況(需滿足前提)
    若僅為 “稀釋倍數計算錯誤”(如實際稀釋了10倍,卻誤按20倍計算),且樣本稀釋過程符合規范(如稀釋均勻、無明顯損失或污染),可通過公式反推修正:
正確濃度 = 錯誤計算時得到的濃度 × 錯誤稀釋倍數 / 實際稀釋倍數
示例:
    實際操作:樣本應稀釋10倍(如10μL樣本+90μL稀釋液),但誤加為10μL樣本+190μL 稀釋液(實際稀釋 20 倍)。
    檢測后:按 “預設的 10 倍稀釋” 計算,得到結果為 100ng/mL(此為錯誤結果,因實際稀釋倍數更高,樣本中真實濃度應更高)。
    修正:正確濃度=100ng/mL×20(實際稀釋倍數)/10(預設稀釋倍數)= 200ng/mL。
 
二、不建議修正或無法修正的情況
    
若存在以下情況,修正結果可能不可靠,建議重新檢測:
    稀釋操作本身錯誤(非單純計算錯誤)
        如 “應稀釋 10 倍卻未稀釋直接檢測”“稀釋時未混勻導致樣本濃度不均”“稀釋液種類錯誤(如誤用緩沖液而非樣本稀釋液)” 等。
        此時樣本中目標物質的實際濃度與理論稀釋倍數無線性對應關系,公式修正無法彌補操作誤差(如未稀釋樣本可能因濃度過高導致鉤狀效應,結果本身已失真)。
    樣本濃度超出試劑盒線性范圍
        若錯誤稀釋后,樣本OD值超出標準曲線的最高 / 最低線性范圍(如標準曲線最高對應濃度為500ng/mL,而錯誤稀釋的樣本按修正公式計算后濃度為 1000ng/mL),此時修正結果無可靠依據(標準曲線外推誤差極大),需重新調整稀釋倍數檢測。
    樣本存在干擾因素
        若樣本本身有溶血、脂血或基質效應,錯誤稀釋可能改變干擾因素的影響程度(如過度稀釋可能降低基質干擾,也可能導致目標物質濃度低于檢測限),修正后結果無法反映真實情況。
 
三、總結
    僅 “稀釋倍數計算錯誤” 且樣本稀釋規范:可按公式修正,但需在結果報告中注明修正原因及過程。
    涉及操作錯誤、濃度超線性范圍或樣本干擾:不建議修正,應重新采集樣本或按正確稀釋倍數重新處理樣本檢測,以確保結果可靠性。
 
    ELISA實驗中 “稀釋倍數” 是影響結果準確性的關鍵因素,建議操作時通過 “雙人核對”“標記稀釋比例” 等方式減少錯誤,避免后續結果修正的麻煩。